Accuris™ Hot Start Taq DNA Polymerase

Giới thiệu về Accuris™ Hot Start Taq

Accuris Hot Start Taq được thiết kế đặc biệt để kiểm soát hoạt động polymerase. Enzyme này được gắn kết với kháng thể đơn dòng (monoclonal antibody) làm bất hoạt hoàn toàn hoạt tính enzyme ở nhiệt độ phòng. Nhờ đó, phản ứng PCR có thể được chuẩn bị ở nhiệt độ thường mà không xảy ra khuếch đại không đặc hiệu.

Khi hỗn hợp phản ứng được gia nhiệt đến 95°C, kháng thể bị biến tính, giải phóng enzyme và khởi động phản ứng.

Ưu Điểm của Accuris™ Hot Start Taq

• Công nghệ Hot Start bằng kháng thể đơn dòng (antibody-mediated)
• Độ nhạy cực cao: vẫn cho băng rõ với chỉ 31,25 ng khuôn genomic (xem hình gel 405 bp DNA ty thể thực vật)
• Lý tưởng cho PCR multiplex và khuếch đại DNA giàu GC
• Hoạt động tốt trên mọi loại khuôn: genomic DNA, cDNA, plasmid, GC-rich, AT-rich
• Buffer độc quyền được tối ưu cho chu kỳ nhanh (fast cycling) và độ lặp lại cực cao
• Cùng nền tảng cải tiến như Accuris Taq Polymerase (khả năng bám khuôn tốt hơn, tốc độ cao hơn)
• Có sẵn dạng 2X Master Mix tiện lợi, giảm số bước pipetting
• Phiên bản Red Master Mix chứa thuốc nhuộm đỏ + vàng (tải gel trực tiếp, không cần loading dye)
• Thuốc nhuộm đỏ di chuyển cùng đoạn 800–1000 bp, thuốc nhuộm vàng di chuyển cùng đoạn 20–30 bp trên gel agarose 1%

Đặc điểm nổi bật

• Chuẩn bị phản ứng ở nhiệt độ phòng do đó không cần giữ trên đá lạnh, giảm sai sót

• Giảm tối đa sản phẩm không đặc hiệu giúp gel sạch, dễ đọc kết quả
• Độ nhạy vượt trội so với Taq thông thường (vẫn khuếch đại tốt dù chỉ còn 31,25 ng khuôn)
• Tiết kiệm thời gian: Master Mix + Red Dye từ đó tải gel ngay, không cần pha thêm loading buffer
• Kết quả ổn định, lặp lại cao giữa các lần chạy và các kỹ thuật viên khác nhau

• Phù hợp cả ứng dụng routine lẫn ứng dụng khó (multiplex, GC-rich, low copy)

Thông số kỹ thuật:

• Độ dài amplicon khuyến cáo: ≤ 5 kb genomic DNA phức, cDNA
• Tốc độ kéo dài: 1-2 kb/phút 60 đến 120 nt/giây ở 72°C
• Thời gian kéo dài: 15-30 giây/kb Master Mix hoặc 30 giây/kb buffer riêng
• Nhiệt độ bắt cặp: 55-67°C thường thấp hơn Taq thông thường nhờ chất tăng cường
• Lượng enzyme: 0.5-2.5 units/50 µl phản ứng
• Nồng độ Mg²⁺ cuối: 1.5-3 mM đã được tối ưu trong buffer
• Bảo quản: -20°C trong 12 tháng, tránh đông-tan băng nhiều lần
• Không phát hiện hoạt tính nuclease DNase/RNase/exonuclease

Phân loại Accuris Hot Start Taq

Ứng dụng

• PCR thông thường & kiểm tra insert Kiểm tra plasmid sau cloning, kiểm tra insert trong vector, kiểm tra kết quả ligation. Band sạch, dày, rất ít non-specific.
• Genotyping Phân tích SNP, kiểm tra dòng chuột biến đổi gen, phân biệt dòng cây trồng, cá giống… hầu hết các lab di truyền ở Việt Nam đều dùng Accuris Taq Red cho bước này.
• Colony PCR Lấy khuẩn lạc trực tiếp bằng tăm hoặc đầu tip, bỏ vào ống PCR có Master Mix đỏ từ 90 đến 95% ra band đẹp mà không cần chiết DNA. Tiết kiệm thời gian cực lớn.
• PCR từ mẫu thô
  • Máu tươi hoặc máu khô trên giấy FTA
  • Mô lá cây, rễ cây, hạt
  • Đất, phân, nước ao nuôi tôm/cá
  • Mẫu thức ăn chăn nuôi Chỉ cần xử lý sơ đun sôi hoặc ly tâm nhanh là chạy được ngay.
• Khuếch đại đoạn GC-rich và AT-rich Đoạn có 70 đến 75% GC hoặc đoạn AT-rich dài vẫn ra band tốt, ít phải tối ưu DMSO hay betaine.
• Dạy học sinh viên & thực hành PCR cơ bản
  • Đại học Bách Khoa, ĐH Khoa học Tự nhiên, ĐH Y Dược, ĐH Nông Lâm… đều chọn Accuris Taq Red làm vật liệu thực hành chính vì giá rẻ, dễ dùng, band đẹp, sinh viên mới làm cũng thành công ngay.
• Kiểm tra nhanh trong nuôi cấy mô thực vật và chẩn đoán phân tử Nhiều công ty nuôi cấy mô lan, công ty giống cây trồng và trung tâm xét nghiệm dùng Accuris Taq Red để kiểm tra nhiễm khuẩn, kiểm tra dòng sạch rất nhanh.
• Multiplex PCR đơn giản 2-4 cặp primer Vẫn cho kết quả ổn định, ít band giả.